自1946年Moore發(fā)現(xiàn)抗生素可顯著提高肉雞的生長速度以來，抗生素作為飼料添加劑已被廣泛應(yīng)用于畜禽和水產(chǎn)養(yǎng)殖中。但與此同時(shí)，因?yàn)E用抗生素產(chǎn)生的細(xì)菌耐藥性、藥物殘留以及過敏中毒反應(yīng)等問題日漸嚴(yán)重。為此，許多國家和組織都提出了無抗養(yǎng)殖模式，中國農(nóng)業(yè)農(nóng)村部第194號公告規(guī)定，自2020年7月1日起，禁止在飼料中添加促生長類抗生素。為保障水產(chǎn)養(yǎng)殖的綠色和可持續(xù)發(fā)展，許多學(xué)者對水產(chǎn)動(dòng)物飼料抗生素替代物進(jìn)行了大量的理論和應(yīng)用研究。本文綜述了近幾年微生態(tài)制劑、抗菌肽、中草藥、植物提取物、寡糖和多糖以及腐殖酸等飼用添加劑的應(yīng)用研究，以期為水產(chǎn)養(yǎng)殖無抗飼料配制提供理論支撐。
1 微生態(tài)制劑
微生態(tài)制劑（probioties）是指利用對宿主有益的微生物或微生物的促生長物質(zhì)，經(jīng)特殊工藝制成的一類制劑，以干粉為主。運(yùn)用微生態(tài)學(xué)原理，將微生態(tài)制劑添加到水產(chǎn)動(dòng)物飼料中，通過改善養(yǎng)殖動(dòng)物內(nèi)外微生態(tài)平衡，促使養(yǎng)殖水體和水產(chǎn)動(dòng)物機(jī)體內(nèi)形成有益微生物群，從而促進(jìn)生長，改良水質(zhì)，增強(qiáng)動(dòng)物抗病能力，減少疾病的發(fā)生。目前，常用的微生態(tài)制劑有芽孢桿菌、光合細(xì)菌、硝化細(xì)菌、酵母菌、乳酸桿菌、雙歧桿菌等，以芽孢桿菌為主。
飼料中添加芽孢桿菌，草魚、團(tuán)頭魴、吉富羅非魚腸道中有害細(xì)菌數(shù)量顯著減少，有益菌群顯著增加[1,2,3]，團(tuán)頭魴幼魚的生長性能顯著提高，而魚體成分無明顯變化[2]，吉富羅非魚幼魚的抗氧化能力和力顯著增強(qiáng)[3]。飼料中添加0.02%微生態(tài)制劑干粉，主要含枯草芽孢桿菌，能顯著提高錦鯉的生長性能，增加腸道消化酶的活性[4]。龍虎斑飼料中分別添加芽孢桿菌和光合細(xì)菌，增重率和末體重顯著上升，飼料系數(shù)顯著下降，魚體血清指標(biāo)值和肝臟抗氧化指標(biāo)值顯著提升，對哈維氏弧菌攻毒保護(hù)率大幅提高[5]。刺參日糧中添加一定量活性酵母，可提高其特定生長率以及體腔液中過氧化氫酶（CAT）、溶菌酶（LZM）、酸性磷酸酶（ACP）、超氧化物歧化酶（SOD）活性，有效降低攻毒死亡率[6]。將2種或2種無拮抗的微生物制成復(fù)合微生態(tài)制劑，菌株間相互協(xié)同作用，比單一微生態(tài)制的劑效果更理想。刺參飼料中添加復(fù)合微生態(tài)制劑，可促使幼參腸道異養(yǎng)菌數(shù)量上升，弧菌數(shù)量下降，腸道胃蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶和胰蛋白酶活力增強(qiáng)，體壁粗蛋白和糖分含量增加，體壁灰分含量降低，刺參增重率、特定生長率等生長指標(biāo)和體腔液中非特異性酶及LZM活性顯著提高[7,8]。由枯草芽孢桿菌、米曲霉和酵母菌組成的復(fù)合微生態(tài)制劑能顯著提高羅非魚白細(xì)胞的數(shù)量，降低由鏈球菌和嗜水氣單胞菌引起的死亡率[9]。將芽孢桿菌、光合細(xì)菌、EM菌按一定比例拌料飼養(yǎng)大鱗副泥鰍32d，能顯著提高泥鰍養(yǎng)殖生長性能，提高飼料轉(zhuǎn)化率，提高魚體粗蛋白含量，降低粗脂肪含量，提高泥鰍血清溶菌酶活力和SOD活力[10]。
2 抗菌肽
抗菌肽（antibacterial peptide）是由20～60個(gè)氨基酸殘基組成的一類堿性多肽類物質(zhì)，廣泛存在于生物體內(nèi)；在魚類的黏液和一些器官中廣泛分布抗菌肽，具有廣譜抗菌活性和調(diào)節(jié)能力。目前，已能通過生物合成、酵母菌表達(dá)等方式工業(yè)生產(chǎn)抗菌肽，其熱穩(wěn)定性良好，能耐受飼料生產(chǎn)過程中制粒的高溫而不影響活性。不同于多肽類抗生素，抗菌肽副作用、無殘留，具有廣譜抗細(xì)菌、抗病毒、抗真菌、抗寄生蟲、抗腫瘤和增強(qiáng)功能[11]。大量研究表明，在水產(chǎn)動(dòng)物飼料中加入一定量抗菌肽，可以促進(jìn)養(yǎng)殖動(dòng)物的生長，提高其功能和抗病力。湘云鯽飼糧中添加天蠶素抗菌肽，可明顯提高魚體增重率、末均重、特定生長率及肥滿度，增加魚體血清SOD和LZM活性，提高嗜水氣單胞菌攻毒后的存活率[12]。凡納濱對蝦飼料中添加一定量的抗菌肽，對蝦相對增重率以及SOD、LZM活性顯著提高，對蝦感染細(xì)菌和白斑綜合征病毒后的成活率顯著增加，其功能得以改善[13,14]。吉富羅非魚飼料中添加抗菌肽Surfactin，魚體腸道皺襞高度顯著增加，腸道菌群中大腸桿菌數(shù)量顯著下降，乳酸桿菌數(shù)量顯著上升，腸道T-AOC、SOD和谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）活性顯著提高，丙二醛（MDA）水平顯著降低，抗菌肽Surfactin添加量為50mg/kg飼料時(shí)，腸道健康狀態(tài)佳[15]。
3 中草藥
中草藥（Chinese herbal medicine）飼料添加劑是以中草藥為原料經(jīng)過加工提取等工藝制成的飼料添加劑，，安全可靠，經(jīng)濟(jì)環(huán)保，兼具藥物和營養(yǎng)雙重功能，目前已在水產(chǎn)動(dòng)物中廣泛使用，被列入飼料原料目錄。中草藥既可單味添加，也可復(fù)方添加；可以原料藥添加，也可以提取物添加，但主要以復(fù)方，原料經(jīng)烘干粉碎使用。研究表明，魚用中草藥飼料添加劑可以提高動(dòng)物的生產(chǎn)性能與抗病力，改善動(dòng)物產(chǎn)品質(zhì)量與飼料品質(zhì)[16]。Seyed Hossein Hoseinifar等在飼料中添加白梭梭投喂鯉魚后發(fā)現(xiàn)，鯉魚的終體質(zhì)量、增重率、特定生長率及飼料轉(zhuǎn)化率等生長指標(biāo)顯著提高，溶菌酶、蛋白酶、球蛋白及補(bǔ)體活性等指標(biāo)顯著升高[17]。Yunis-Aguinaga Jefferson等研究發(fā)現(xiàn)，貓爪草可以提高尼羅羅非魚生長性能，增強(qiáng)其功能[18]。馬國紅等以黃芪、黃柏、大黃、大青葉復(fù)方或六神曲按基礎(chǔ)飼料7‰～15‰添加喂養(yǎng)鯉魚，具有明顯的促生長作用[19]。尚書鳳等用甘草、板藍(lán)根、金銀花、陳皮、肉桂和杜仲按質(zhì)量等比例配制成傳統(tǒng)中草藥添加劑和超微粉添加劑，按1%～3%比例添加喂養(yǎng)草魚，對實(shí)驗(yàn)魚生長和肌肉蛋白質(zhì)的積累具有促進(jìn)的作用，而且超微粉復(fù)方中草藥添加飼料的使用效果優(yōu)于傳統(tǒng)中草藥添加飼料的[20]。Fu等研究發(fā)現(xiàn)，飼料中添加4.00mg/L復(fù)方中草藥（成分：大蒜、黃芪、甘草和桑葉），草魚血清中SOD、LZM、堿性磷酸酶（AKP）和ACP的活性顯著增強(qiáng)，小瓜蟲和指環(huán)蟲的感染強(qiáng)度明顯下降[21]。冒樹泉等以板藍(lán)根、大黃或黃芪、黃柏按1∶1比例，按基礎(chǔ)飼料的3‰添加，飼養(yǎng)大鱗副泥鰍60d，發(fā)現(xiàn)其可促進(jìn)生長、消化，提高機(jī)體抗氧化能力[22]。劉玉廷在泥鰍日糧添加由杜仲、黃芪、銀花、板藍(lán)根等8味中藥組成的復(fù)方，添加劑量為10g/kg飼料，能改善泥鰍生長性能，調(diào)節(jié)肝胰臟脂代謝和腸道菌群構(gòu)成，肝胰臟和腸道非特異性功能提高，促進(jìn)腸道消化吸收功能[23]。黃鱔飼料中添加一定量復(fù)方中草藥（主要成分：杜仲、山楂、當(dāng)歸、白術(shù)、大黃、肉桂、黃芪、小茴香、黃芩等），添加量為1%時(shí)，黃鱔增重率、成活率、非特異性功能以及腸道消化酶活性顯著提高，魚肉品質(zhì)得以改善[24]。
4 植物提取物
植物提取物是以植物為原料，通過一定的物理或化學(xué)方法提取分離制得的含一種或多種有效成分的產(chǎn)品。植物提取物成分復(fù)雜，其主要活性物質(zhì)包括甙、多糖、多酚、萜類、酸、黃酮、生物堿等，能夠調(diào)節(jié)動(dòng)物腸道健康，提高機(jī)體抗氧化力和力，促進(jìn)生長發(fā)育。呂慧源等研究發(fā)現(xiàn)，飼料中添加0.2%復(fù)合植物提取物（黃芪提取物、甘草提取物、大黃提取物、川芎提取物等），羅氏沼蝦血液和肝胰腺中的非特異性指標(biāo)（LZM、SOD、CAT、AKP活性）、血液吞噬率、吞噬指數(shù)顯著升高，注射鰻弧菌死亡率降低，魚體增重率顯著提高[25]。劉泓宇等在飼料中添加200mg/kg植物提取物飼喂凡納濱對蝦8周后發(fā)現(xiàn)，與氟苯尼考對照組相比，蝦體血細(xì)胞吞噬率、SOD、LZM、酚氧化酶（PO）活性及抗菌活力均顯著升高[26]。Putra A.S.等研究發(fā)現(xiàn)，飼料中添加1%的乙醇卡托克葉提取物可增加石斑魚食欲，提高飼料利用率[27]。C John Wesly Kirubakaran等用一定劑量的夜花種子氯仿提取物飼喂羅非魚，發(fā)現(xiàn)魚體血清補(bǔ)體、溶菌酶活性和細(xì)胞內(nèi)活性氧自由基、過氧化物酶、活性氮中間體含量顯著提高；同時(shí)，添加0.1%和1.0%夜花種子提取物的飼料可以顯著降低羅非魚的死亡率[28]。適量添加金銀花提取物綠原酸，可顯著促進(jìn)中華鱉、建鯉、草魚魚種的生長性能，提高它們的抗氧化能力，并有效改善草魚肉質(zhì)[29,30,31]。紫錐菊及其提取物作飼料添加劑可提高彭澤鯽和大菱鲆魚等的抗氧化水平，增強(qiáng)其非特異性功能[32,33]，相較于左旋咪唑，紫錐菊提取物對神仙魚的促生長效果更佳[34]。團(tuán)頭魴飼料中添加一定量黃連素，可明顯提高魚體LZM、ACP活性和補(bǔ)體C3、C4含量等指標(biāo)，減緩高脂飼料喂養(yǎng)后的氧化應(yīng)激進(jìn)程，降低細(xì)胞凋亡率[35]。
5 寡糖和多糖
寡糖（oligosaccharides）和多糖（polysaccharides）作為增強(qiáng)劑，具有來源廣泛，低成本，，安全等優(yōu)點(diǎn)，是動(dòng)物飼料中抗生素替代物研究的方向之一。寡糖又稱低聚糖，分為普通寡糖和功能性寡糖2種。功能性寡糖具有動(dòng)物保健、增強(qiáng)機(jī)體抗氧化力和力、促消化促生長等功能，于20世紀(jì)80年代就已被開發(fā)為飼料添加劑。我國目前添加的主要種類有甘露聚糖、果聚糖、低聚木糖和糖萜素[36]等。于艷梅等研究發(fā)現(xiàn)，飼料中添加0.2%的魔芋甘露聚糖，可以顯著提高黃顙魚血液白細(xì)胞的吞噬活性，增強(qiáng)血清中LZM和SOD活性，增加黃顙魚頭腎指數(shù)、后腎指數(shù)和脾體指數(shù)，促進(jìn)魚體生長[37]。趙峰等在飼料中添加一定量果寡糖（果聚糖）飼喂奧尼羅非魚后發(fā)現(xiàn)，0.4%～0.5%添加組魚體相對增重率顯著提高，飼料系數(shù)顯著下降，血清總蛋白、白蛋白含量顯著升高，腸道中有益菌（乳酸桿菌、雙歧桿菌）數(shù)顯著增加，有害菌（大腸桿菌、沙門氏菌）數(shù)顯著下降[38]。飼料中添加一定量低聚木糖對凡納濱對蝦[39]、羅非魚[40]、花鱸幼魚[41]的生長具有明顯的促進(jìn)作用，且能提高魚體的功能以及凡納濱對蝦[39]抗氨氮脅迫能力。飼糧添加0.4%～0.5%的果寡糖，可改善奧尼羅非魚的生長性能，增加腸道有益菌，降低有害菌數(shù)量[42]。添加0.05%～0.20%的果寡糖，能改善斜帶石斑魚的功能和腸道形態(tài)，超氧化物歧化酶、溶菌酶、酸性磷酸酶活性提高，腸道絨毛高度和肌層厚度增加[43]。在含4%豆油的常規(guī)飼料中添加0.02%的殼寡糖可以促進(jìn)異育銀鯽生長，改善腸道結(jié)構(gòu)，提高魚體非特異性功能；在飼料中添加0.04%的殼寡糖，可改善由氧化豆油引起的負(fù)面影響，使異育銀鯽的健康程度達(dá)到正常水平[44]。在飼料中添加200～400mg/kg甘露寡糖，可顯著提高特定生長率、肥滿度、腸體指數(shù)和腸長指數(shù)，降低餌料系數(shù)，顯著提高腸道乳酸桿菌和雙歧桿菌數(shù)量，顯著降低大腸埃希菌數(shù)量，提高血漿和肝胰臟SOD、CAT活性[45]。
多糖是一類高分子聚合糖，通常從動(dòng)植物、細(xì)菌、真菌等生物體中提取獲得，因此也稱天然多糖，因富含活性，也稱多糖，能夠抗細(xì)菌、抗病毒，并增強(qiáng)機(jī)體防御功能，已在水產(chǎn)養(yǎng)殖中開展了廣泛的應(yīng)用研究。目前研究報(bào)道比較多的有：植物源性的黃芪多糖、茯苓多糖、枸杞多糖，真菌源性的酵母多糖、靈芝多糖、香菇多糖和動(dòng)物源性的殼聚糖等。譚連杰等分別用添加3種不同植物多糖的飼料飼喂卵形鯧鲹，結(jié)果表明，當(dāng)歸多糖和枸杞多糖均能提高幼魚的抗氧化能力，增強(qiáng)機(jī)體功能，但促生長作用不明顯；0.2%黃芪多糖顯著提高了鯧鲹幼魚的生長性能指標(biāo)（末質(zhì)量、增重率和特定生長率）、肝臟抗氧化指標(biāo)（T-AOC、SOD活力）和血清中LZM、C3、C4含量，幼魚血清白蛋白、低密度脂蛋白、高密度脂蛋白、膽固醇和甘油三酯水平均較對照組變化顯著[46]。林建斌研究發(fā)現(xiàn)，飼料中添加適宜海藻多糖或紫菜多糖，大黃魚的增重率顯著對照組，添加量為0.5%時(shí)，魚體AKP、SOD和LZM活力均顯著提高，機(jī)體力增強(qiáng)[47]。凡納濱對蝦飼料中添加0.2%β-葡聚糖或0.4%甘露聚糖，可提高對蝦增重率，降低飼料系數(shù)，改善消化酶活性，增強(qiáng)魚體非特異性功能[48]。飼料中添加200mg/kg黃芪多糖對臺灣泥鰍苗的生長具有促進(jìn)作用，添加400mg/kg會(huì)抑制臺灣泥鰍苗的生長[49]。
6 腐殖酸及其制品
腐殖酸（humic acid）是動(dòng)植物殘?bào)w經(jīng)微生物分解及一系列物理化學(xué)作用后形成的一類高分子有機(jī)物的聚合體，廣泛存在于天然腐殖質(zhì)中，其分子中含有羧基、酚羥基等許多活性基團(tuán)，具有抗氧化、、抗菌等生物學(xué)功能。腐殖酸及其制品作為飼料添加劑應(yīng)用于畜禽生產(chǎn)已有30余年歷史，取得了良好的效益，并被列入到了飼料原料目錄。近年來，許出學(xué)者對腐殖酸及其制品在水產(chǎn)養(yǎng)殖中的研究報(bào)道也顯示出其具有良好的改善水質(zhì)、促生長作用及增強(qiáng)機(jī)體力、抗病力等功能[50,51]。烏蘭等研究發(fā)現(xiàn)，飼料中添加適宜含量黃腐酸，鯽魚增重率顯著提高，魚體肝胰臟淀粉酶、蛋白酶活性和腸道淀粉酶活性顯著增加，血清中非特異性相關(guān)酶（SOD、LZM、AKP）活力顯著升高，魚體肌肉中α-亞麻酸、花生四烯酸、二十碳五烯酸、二十二碳六烯酸等多不飽和脂肪酸含量增加，粗蛋白含量變化不顯著[52,53,54]。Deng J M等研究表明，飼料中添加0.28%～0.37%的腐殖酸鈉，可顯著改善吉富羅非魚幼魚的生長性能和飼料利用率，提升其腸道消化酶活性，提高魚體的抗氧化能力（CAT、SOD、GSH-Px、GST活性顯著增加）和機(jī)體的力[55]。飼料中添加0.3%的腐殖酸鈉，能改善青蝦的生產(chǎn)性能[56];Musthafa等在飼料中添加0.4%～0.6%的富含腐殖酸的Shilajit產(chǎn)品飼喂莫桑比克羅非魚，發(fā)現(xiàn)莫桑比克羅非魚的生長性能和飼料利用率顯著提高[57]。李志偉研究表明，黃腐酸添加水平為1%時(shí)，可以明顯提高泥鰍腸道LZM、球蛋白M、C3、AKP和ACP活性，增強(qiáng)泥鰍腸道功能[58]。飼料中添加180～360mg/kg的腐殖酸[59]、0.8%～1.0%[60]和1.0%[61]能顯著提高鯉魚的生長速度和飼料利用率。莫桑比克羅非魚飼料中添加富含腐殖酸的Shilajit產(chǎn)品0.4%～0.6%，羅非魚的生長性能和飼料利用顯著提升[62]，但是歐洲鱸魚飼料中添加0.25%～1.5%[63]、虹鱒飼料中添加腐殖酸0.3%～1.2%[64]卻均未表現(xiàn)出改善魚生長性能的效果。腐殖酸能保護(hù)褐鱒（Salmo truttafario）抗氧化防御系統(tǒng)免受鎘等有毒金屬的損傷[65]，鯉魚飼料中添加腐殖酸，可增強(qiáng)其抗氧化能力和力[66]。大鱗副泥鰍飼料中添加黃腐酸，可以有效增強(qiáng)器官抗應(yīng)激、抗氧化能力，維持腸道的健康[67]。筆者開展了腐殖酸鈉對臺灣泥鰍生長性能及抗氧化的影響研究，在為期66d的飼養(yǎng)試驗(yàn)中，表明臺灣泥鰍幼魚飼料中添加20.0%的腐殖酸鈉，能顯著提高其生長性能，能有效增強(qiáng)肝臟CAT、GSH-Px、SOD等抗氧化酶的活性，提升總抗氧化能力（T-AOC），降低肝臟中MDA含量。
7 其他
酶制劑、酸化劑、蝦青素、核苷酸等對水產(chǎn)養(yǎng)殖動(dòng)物的生長和力同樣具有積極的影響。王國霞等研究發(fā)現(xiàn)，黃顙魚飼料中添加200mg/kg復(fù)合酶制劑能顯著提高魚體血清總蛋白濃度、LZM及谷草轉(zhuǎn)氨酶活力，添加量為400mg/kg時(shí)，魚體生長性能和血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶活力顯著提高，血清尿素水平顯著降低[68]。草魚飼料中添加適宜水平的酸化劑，可提高草魚特定生長率，降低飼料系數(shù)，具有明顯的促生長作用[69,70]。吳雪芹等在大鱗副泥鰍飼料中添加不同水平蝦青素，結(jié)果表明，100～200mg/kg添加水平，魚體末重、增重率、蛋白質(zhì)效率和飼料效率顯著提高，添加量為50～200mg/kg時(shí)，魚體腸道消化酶（蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶）活力和抗氧化指標(biāo)顯著對照組?？梢?，適宜蝦青素對泥鰍的生長和抗病力具有促進(jìn)作用[71]。在團(tuán)頭魴飼料中添加200mg/kg的酵母核苷酸，可促進(jìn)魚體生長，增強(qiáng)機(jī)體的抗氧化功能，減少嗜水氣單胞菌攻毒后的死亡率，而不影響魚體血糖、血脂代謝和肝功能[72]。
8 小結(jié)
以上添加劑無抗藥性、無殘留，綠色，在目前眾多抗生素替代物中具有良好的開發(fā)應(yīng)用前景。但值得注意以下幾點(diǎn)：，部分抗生素替代物的應(yīng)用機(jī)理尚不明確，需對其作用機(jī)制進(jìn)一步開展研究；其次，添加量尚不統(tǒng)一，需根據(jù)養(yǎng)殖動(dòng)物種類和生理階段的不同制定相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)。2020年，我國已步入無抗養(yǎng)殖時(shí)代，但在實(shí)際生產(chǎn)中仍存在養(yǎng)殖動(dòng)物疾病發(fā)生、產(chǎn)量降低等問題，所以要真正實(shí)現(xiàn)無抗養(yǎng)殖，水產(chǎn)養(yǎng)殖的健康可持續(xù)發(fā)展，對抗生素替代產(chǎn)品的研發(fā)將是一個(gè)長期的過程，不能一蹴而就。

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